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化学发光免疫测定

编辑:广州博鹭腾仪器仪表时间:2018-10-11

原理:

化学发光免疫测定(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是用化学发光剂直接标识表记标帜抗原或抗体(化学发光剂标识表记标帜物),与待测标本中相应抗体或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反响反应,经过过程磁场把联结状态(沉淀部分)和游离状态的化学发光剂标识表记标帜物别离开来,然后插手发光促进剂停留发光反响反应,经过过程对付发光强度的检测停留定量或定性检测.

技术类型:

1.别离方法 每每应用磁颗粒别离技术

2.免疫学反响反应模式 异酶发光免疫测定技术,重要也有双抗体夹心法、双抗原夹心法和固相抗原竞争法三种重要模式,所不异只是相应标识表记标帜抗原或抗体上标识表记标帜的是吖啶酯而不是酶。

技术要点:

1.每每应用的实验材料

  (1)化学发光剂标识表记标帜物:临床上最每应用的发光剂是吖啶酯类发光剂。吖啶酯类具有较着的所长:①氧化反响反应不需催化剂,惟独碱性景遇中便可以停留。反响反应物在插手H2O2后再加氢化钠溶液,发光反响反应快速,本底低。②在氧化反响反应过程中,联结物被分解,是以游离的吖啶酯的发光不受抑制。③试剂稳定性好。

  (2)免疫磁颗粒:指由抗原或抗体包被的磁颗粒。

  (3)反响反应试剂:指发光物发光时所需的氧化剂(H2O2)和PH匡正液(NaOH)。

  (4)定标液和质控液。

  2.双抗体夹心法其重要步骤为:

  (1)抗原抗体反响反应:将包被双克隆抗体的磁颗粒和待测标本插手到反响反应管中,标本中待测抗原与磁颗粒上抗体联结,再加之吖啶酯标识表记标帜抗体,经过温育,形成磁颗粒抗体-抗原-吖啶酯标识表记标帜抗体复合物。

  (2)游离和联结部分的别离:在电磁场中停留2-3次洗涤后,很快天将已经联结的多余抗原和标识表记标帜抗体洗往。

  (3)化学发光反响反应:经过洗涤的磁性颗粒中,插手氧化剂(H2O2)和PH匡正液(NaOH),使其呈碱性,那时候吖啶酯在不需要催化剂的景遇下分解并发光,由集光器停留接收,经光电倍增管放大作用,记录1秒钟内所发作的光子能,那部分光的积分与被测AFP含量成正比,根据范例曲线,仪器可以自动计算出其AFP含量。


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